光绪帝是砒霜中毒而死，但是谁是凶手至今还是个谜，比较符合条件有慈禧、李莲英和袁世凯。有专家检验过光绪帝的头发，发现他并不是病死的，而是死于砒霜中毒，因此光绪帝死因成为清朝一大谜团，至于谁毒害了光绪帝还无从得知。
首先来分析下慈禧毒害光绪帝的可能性，光绪虽然尊称为慈禧为母后，但慈禧跟他并不是母子，慈禧衰老病重时，怕光绪帝在她死后重掌朝政，所以事先将光绪毒死。
慈禧身边太监李莲英也是谋害光绪帝的疑凶，他曾偷偷听到光绪帝说过，等慈禧一死，就处死李莲英和袁世凯，李莲英因怕死才会给光绪下毒。
最后一个嫌疑人是袁世凯，袁世凯怕光绪帝在慈禧死后重掌政权，所以先下手为强，这点在溥仪的《我的前半生》里有记载，书中说光绪帝是在服用袁世凯送的药后驾崩的，可见袁世凯应该就是害死光绪的真凶。